黄芩治疗口腔白斑的网络药理学分析及实验探讨

论文价格:150元/篇 论文用途:硕士毕业论文 Master Thesis 编辑:vicky 点击次数:
论文字数:35666 论文编号:sb2021101819435838869 日期:2021-10-27 来源:硕博论文网
本文是一篇药学论文,笔者认为网络药理学筛选出 SBG 作用于 OLK 的主要有效成分为 BAI,核心靶点为AKT1、VEGFA、EGFR、HIF1A 和 PTGS2 等,关键通路为 PI3K-Akt,分子对接表明主要成分和核心靶点具有较强的结合力,提示 SBG 可能通过多成分、多靶点、多通路协同发挥治疗 OLK 的作用。

第一部分 黄芩治疗口腔白斑作用机制的网络药理学研究

1 数据库与方法
1.1 网络药理学数据库与软件
网络药理学数据库与软件
网络药理学数据库与软件
1.2 SBG 活性成分的筛选及靶点预测通过检索 TCMSP 收集 SBG 的化学成分,检索关键词“黄芩”,选择“Ingredients”,选取 SBG 中 DL(drug-likeness)≥0.18,且 OB(oral bioavailability)≥30%的化合物为成药性较好的潜在活性成分[21],记录活性成分的 PubChem ID、靶点名称。利用PubChem 获取筛选后的 SBG 活性成分的 SDF 格式文件,再上传到 Swiss TargetPrediction 在线数据库进行靶点预测[22]。
............................

2 结 果

2.1 SBG活性成分及其对应靶点的确定
在 TCMSP 数据库中共得到 143 个 SBG 的化学成分,以 OB≥30%、DL≥0.18 为条件筛选出 25 个 SBG 潜在活性成分(表 1),在 SwissTarget Prediction 平台上查找共得到 2170 个潜在治疗靶点,筛除重复后得到 200 个 SBG 的潜在治疗靶点。
表 1 SBG 主要成分
表 1 SBG 主要成分
2.2 OLK 相关靶点的获取
从 Geneards 数据库获得 OLK 靶点 612 个,结合 OMIM 数据库补充 4 个相关靶点,合并后删除重复值,最终得到 615 个 OLK 相关靶点。
2.3 SBG 和 OLK 的交集靶点 PPI 分析
基于以上结果,将 200 个 SBG 潜在靶点与 615 个 OLK 的潜在治疗靶点取交集得到 31 个交集靶点(图 1)。在 PPI 网络(图 2)中度值较高即处于较为核心位置的靶点包括表皮生长因子受体(EGFR)、苏氨酸激酶 1(AKT1)、血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)、缺氧诱导因子(HIF1A)和前列腺素内过氧化物合酶 2(PTGS2)等。利用 Excel 语言将 31 个交集靶点按照相关度排序并绘制柱状图(图 3)。因此 AKT1、EGFR、VEGFA、HIF1A 和 PTGS2 可能是 SBG 发挥抗 OLK 的主要作用靶点。
......................

第二部分 黄芩主要有效成分治疗口腔白斑作用机制的实验研究............................... 18
1 材料与方法....................................18
1.1 主要细胞、试剂和药物...............................18
1.2 主要仪器和设备.........................................19
1.3 主要溶液配制.....................................19
1.4 加药方法...........................................20
1.5 细胞培养...................................20
3 讨 论..................................34
4 结 论.....................................37

3 讨论

3.1 OLK、BAI和DOK细胞
OLK 发生发展过程中涉及的机制复杂、蛋白靶点多、通路多,单一靶向药物无法达到预期的治疗效果。SBG 因其突出的抗炎,抗癌,抗氧化等药理作用和多成分-多靶点的特性为 OLK 的治疗提供了希望。但深入研究 SBG 的潜在作用机制具有很大的挑战性。结合网络药理学和拓扑参数分析,我们可以系统地挖掘中药的有效活性成分,作用靶点和治疗通路。
通过第一部分网络药理学分析,筛选出了 SBG 最主要的有效成分 BAI,同时确定了活性化合物的中枢靶点 EGFR、AKT1、VEGFA、HIF1A 和 PTGS2 和 SBG 发挥抗 OLK 的关键信号通路 PI3K-Akt。第二部分通过分子生物学验证网络药理学分析结果的可靠性。
BAI 是一种具有生物活性的黄酮类化合物,广泛用于保健品和药品中,在预防和治疗癌症方面显示出巨大的潜力[44]。现国内外大量研究证实 BAI 可诱导癌细胞凋亡,使细胞周期阻滞,对血管生成、转移和炎症有抑制作用[9, 11]。研究发现 BAI 在多种肿瘤如肝细胞癌、肺癌、乳腺癌中具有显著的抗肿瘤作用[12, 45, 46],但其抗 OLK的分子机制及其潜在靶点尚不清楚。进一步研究 BAI 抗 OLK 作用的机制可能为临床治疗 OLK 提供可能。
DOK 细胞于 1992 年从一名白斑患者的舌部原代培养而来,后被大量用于研究OLK 等口腔上皮异常增生性疾病的细胞模型[47];周曾同等研究表明 DOK 细胞无论是生长速度,增殖能力,倍增时间以及细胞内部的 DNA 合成能力等都介于正常细胞和肿瘤细胞之间,可作为研究 OLK 的理想细胞模型[48]。
.............................

4 结论

1、 网络药理学筛选出 SBG 作用于 OLK 的主要有效成分为 BAI,核心靶点为AKT1、VEGFA、EGFR、HIF1A 和 PTGS2 等,关键通路为 PI3K-Akt,分子对接表明主要成分和核心靶点具有较强的结合力,提示 SBG 可能通过多成分、多靶点、多通路协同发挥治疗 OLK 的作用。
2、 细胞学实验结果表明 BAI 可能通过抑制 PI3K-Akt 通路抑制 DOK 细胞增殖、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期并抑制核心靶点 mRNA 的表达水平,验证了网络药理学筛选结果和预测分子机制的可靠性和准确性,提示 SBG 可能具有治疗 OLK 的潜力,值得进一步研究。
参考文献(略)